Browsing by Author "LIN TIAO-YIN"
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Item type:Item, CXXC主題結構的第一個X對氧化還原性質調控的研究(2002) ;林苕吟 ;LIN TIAO-YIN交通大學生物科技研究所Item type:Item, Thioredoxin和線形噬菌體f1的GeneI蛋白質交互作用之研究(1999) ;林苕吟 ;LIN TIAO-YIN交通大學生物科技研究所Item type:Item, Thioredoxin的活性位置氨基酸序列對蛋白質的折疊、穩定性和功能的影響(1996) ;林苕吟 ;LIN TIAO-YIN國立交通大學生物科技研究所Item type:Item, Thioredoxin的活性位置胺基酸序列對此蛋白質的折疊和氧化還原電位的影響(1995) ;林苕吟 ;LIN TIAO-YIN國立交通大學Item type:Item, Thioredoxin的活性區氨基酸序列對其折疊、穩定度及氧化還原電位的影響(1997) ;林苕吟 ;LIN TIAO-YIN交通大學生物科技研究所Item type:Item, 一個以Pro替代Gly的非典形thioredoxin活性區(2005) ;林苕吟 ;LIN TIAO-YIN國立交通大學生物科技學系(所)屬於thioredoxin 超級家族的氧化還原酵素的活性區含有CXXC 之主題結構。在 thioredoxin 此序列是CGPC,且從大腸桿菌到人類具有高度的保留性。有趣的是在 Arabidopsis thaliana 和Populus trihocarpa cv. Trichobel 所含有的多個thioredoxin h 當中, 竟然有些呈現Gly→Pro 的轉變於第一個X 處。目前對這種蛋白的性質,以及第一個X 位置Gly/Pro 相互轉變之影響的研究,提供了我們相當複雜的功能上之結果。但其機制 原理卻無真正的研究。 任何的氧化還原酵素在執行功能時必須將電子轉移至其標的物。功能上最終結果實 際上是其與標的物間交互作用,以及酵素氧化還原性質的縱合表現。在此計畫中,我們 用大腸桿菌thioredoxin 來探討究竟第一個X 位置Gly 到Pro 的轉換是改變其氧化還原性 質或是其與標的物間的作用,或者兩者皆受影響。我們將用定點突變把此位置由Gly 改 變成Pro,然後純化出突變種及野生種蛋白。接著我們將研究突變種與野生種蛋白的直 接氧化還原平衡,cysteines 的有效濃度,以及用thioredoxin reductase 所催化的蛋白質還 原反應所得的氧化還原電位。由這些可得知突變種與野生種的氧化還原性質有無改變。 我們也將利用數種噬菌體在攜帶突變種及野生種thioredoxin 基因的菌株下的平盤效率 來評估Gly→Pro 替代對於蛋白質間交互作用的影響,如此可排除氧化還原的影響。此 外,我們也將比較突變種與野生種蛋白質在氧化態與還原態下的結構和穩定度。這些研 究將使我們對Gly→Pro 替代的根本效應及為甚麼須要採用非典型的Pro 於CXXC 主題 結構有更深入的瞭解。Item type:Item, 大大腸桿菌Thioredoxin含活性區序列CVPC是否Thioredoxin Reductase所催化的反應中具有功能?(2000) ;林苕吟 ;LIN TIAO-YIN國立交通大學生物科技研究所Item type:Item, 氧化還原蛋白CXXC主題結構中的第一個X如何調控氧化還原性質?(結構蛋白體學研究計畫)(2001) ;林苕吟 ;LIN TIAO-YIN交通大學生物科技研究所Item type:Item, 突變種大腸桿菌Thioredoxin支持噬菌體生長之研究(2000) ;林苕吟 ;LIN TIAO-YIN交通大學生物科技研究所Item type:Item, 蛋白表面單一疏水性氨基酸替代對Thioredoxin穩定作用之探討(2006) ;林苕吟 ;LIN TIAO-YIN國立交通大學生物科技學系(所)蛋白質表面以疏水性氨基酸替代所引起之蛋白質穩定或不穩定是一個複雜的現 象,且非所有已知之例皆可被合理的解釋或預測。學者提出此種現象是受到蛋白質內 涵的影響(context effect)。蛋白表面以疏水性氨基酸替代常引起之蛋白質不穩定或者不造 成影響,因此種替代而導至蛋白質穩定相對較少,但也有這種例子存在。學者提出以 形成小型的外部疏水叢(SEHC)來解釋表面疏水性氨基酸替代所造成之蛋白質穩定。但 實驗設計用來檢驗是否形成SEHC 在文獻上卻很缺乏。我們的實驗結果發現將 thioredoxin 的表面Gly33 改成Ile 會提高蛋白質的穩定度。在此計劃我們將研究當蛋白 質的內涵缺少一雙硫鍵,表面疏水性氨基酸替代所造成的蛋白質穩定程度是否會有改 變?同時我們將設計實驗去研究結構及物理化學上的特徵,以探索氧化態與還原態突變 蛋白形成SEHC 的可能性。我們可比較突變蛋白和野生蛋白在這些性質上的差異,以 及它們和穩定程度上的關係。配合結構的模擬以及進一步實際結構的測定,我們可對 於表面疏水性氨基酸替代所造成之蛋白質穩定有更深入的瞭解。瞭解表面疏水性氨基 酸替代導致蛋白質穩定之因子可幫助我們改善蛋白質穩定性以利各方面的應用。