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Browsing by Author "HWEI-LINGPENG"

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    人類尿嘧碇雙磷酸葡萄糖去氫？cDNA及基因的選殖，定性和酵素的特性分析(III)
    (2000)
    彭慧玲
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    HWEI-LINGPENG
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    交通大學生物科技研究所
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    克雷白氏肺炎桿菌性腦膜炎：細胞分析模式的建立，致病因子的分離鑑定和致病機制的探討
    (2001)
    彭慧玲
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    HWEI-LINGPENG
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    國立交通大學生物科技學系
    克雷白氏肺炎桿菌屬一伺機性感染的細菌，臨床上常造成菌血症、尿道和呼吸道感染。此菌在台灣糖尿病病人化膿性肝膿瘍、眼內炎、腦膜炎和敗血性肺栓塞的顯著比例，特別受到我們國內醫生、感染專家與學者的重視。最近國內外各大醫院均報導，成人和幼兒罹患克雷白氏肺炎桿菌腦膜炎的病例有日漸增多的趨勢，同時因為克雷白氏肺炎桿菌高比例的抗藥性問題，阻礙了抗生素治療的時效性，而造成病人死亡或嚴重的後遺症，針對新目標做新藥開發的工作更是刻不容緩。我們希望了解克雷白氏肺炎桿菌腦膜炎的致病機轉，藉著干擾這些克雷白氏菌致病相關基因的功能來發展專一而有效的治療藥物或疫苗。我們未來二年的研究規劃如下： （一） 第一年：我們計劃和台北榮總馮長風醫師合作，收集及分析克雷白氏肺炎桿菌腦膜炎菌株。首先進行血清學及各種分子的分型法分析，以了解是否有一特殊菌株與腦膜炎有關；同時，我們將建立細胞分析模式以提供探討這些菌株引起腦膜炎的可能機轉。我們進一步將藉由美國國家生物資訊中心的分析比對軟體，由已公佈克雷白氏肺炎桿菌的基因體核酸序列中，找出和致病相關的目標序列，包括特殊的黏附蛋白、侵入因子等，加上我們實驗室所發現數個與毒性調控相關的候選基因，來設計特定的引子組以聚合脢鏈鎖反應分析所收集的腦膜炎菌株。而對存在於這些腦膜炎分離株且未曾被仔細分析的致病候選基因，我們將進行基因選殖的工作，並藉由大腸桿菌的表現系統來表現這些致病相關的蛋白質。 （二） 第二年：我們將設法大量生成這些致病相關的基因產物，並純化這些重組蛋白，更進一步作生物及生化活性的測試。並藉本實驗室已建立克雷白氏菌的基因突變系統，來作基因剔除實驗，希望比較分析這些突變株和野生株的生物活性，譬如對黏附或入侵細胞株的能力和對小鼠毒性的改變，來了解這些致病相關的基因在其致病機轉中扮演的角色。確定這些基因和細菌致病能力的相關性後，我們將進一步研究調控這些基因表現的因子，研擬可能的標的發展藥物來干擾細菌致病的機制，達到控制和治療克雷白氏菌腦膜炎的目的。
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    克雷白氏肺炎桿菌的分子致病機制研究
    (2000)
    彭慧玲
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    HWEI-LINGPENG
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    國立交通大學生物科技研究所
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    克雷白氏肺炎桿菌訊息傳遞系統KvgASQR 和 KvgASII的分子調控研究(I)
    (2001)
    彭慧玲
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    HWEI-LINGPENG
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    國立交通大學生物科技研究所
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    克雷白氏肺炎桿菌訊息傳遞系統KvgASQR和KvgASII的分子調控研究(II)
    (2002)
    彭慧玲
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    交通大學生物科技研究所
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    克雷白氏肺炎桿菌訊息傳遞系統KvgASQR和KvgASII的分子調控研究(III)
    (2003)
    彭慧玲
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    HWEI-LINGPENG
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    國立交通大學生物科技研究所
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    全基因體化分析克雷白氏肺炎桿菌CG43的雙分子調控系統
    (2004)
    彭慧玲
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    HWEI-LINGPENG
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    交通大學生物科技研究所
    許多臨床分離的克雷白氏肺炎菌株具有高度的抗藥活性，近年來更 因抵抗廣效性β-lactam 抗生素的克雷白氏肺炎菌株急遽增加，限制了臨床可 用藥物的效益。為了尋找新的抑菌標的，我們在此提出一個針對高毒性克 雷白氏肺炎菌株CG43 的全基因體研究分析，目的在建立訊息感應蛋白 （sensor）和調控蛋白（response regulator）雙分子調控系統在此菌體內的 溝通網路，而在未來三年特定的計畫目標如下： 一、 在克雷白氏肺炎菌株CG43 中分離所有經序列比對被註解為雙 分子調控系統可能的調控子（promoter），同時建立這些調控 子的報告系統，藉分析LacZ 酵素活性來量度各個調控子的活 性並找出各個雙分子調控系統可能的訊息。 二、 藉cross-over PCR 系統化的建立全基因體的調控蛋白突變 株，並分析這些突變株的表現型。 三、 在克雷白氏肺炎菌株CG43 中大量表現這些調控蛋白，並偵測 各個具有過量調控蛋白的突變菌株表現。 四、 分析各個調控子在上述建構的突變株中的活性變化，藉此活 性變化反應來推斷各個雙分子調控系統可能的交互作用。 五、 藉報告調控子活性系統來尋找可受調控蛋白突變影響的標的 基因。 六、 藉二維電泳分析比較克雷白氏肺炎菌株CG43 與調控蛋白突變 的蛋白體，尋找受此調控蛋白調控的標的蛋白。
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    全基因體化分析克雷白氏肺炎桿菌纖毛基因組的表現(I)
    (2005)
    彭慧玲
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    HWEI-LINGPENG
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    國立交通大學生物科技學系(所)