标题: | 研发可辨识绿脓杆菌及具有P菌毛的大肠杆菌的磁性奈米探针 Affinity Capture of Pseudomonas aeruginosa and P fimbriated Escherichia coli Using Functional Magnetic Nanoparticles |
作者: | 刘致圻 Liu Jr-Chi 陈月枝 Chen Yu-Chie 应用化学系硕博士班 |
关键字: | 磁性;奈米粒子;大肠杆菌;致病菌;尿道感染;magnetic;nanoparticles;E. coli;phathogen;urinary tract infection |
公开日期: | 2007 |
摘要: | 由细菌引发尿道感染的病患中,有80 %的案例是由大肠杆菌所引起的。尿道感染的主要症状有膀胱炎及肾盂肾炎,肾盂肾炎主要是由含有P菌毛之大肠杆菌,亲和黏附于肾脏上皮细胞表面的Gal(α1-4)Galβ而致病。鸽卵白蛋白的结构上,富含末端为Gal (α1-4)Galβ的醣序列,因此可以用来辨认具有P菌毛的大肠杆菌。 本论文首先证明鸽卵白蛋白为磷酸化蛋白质后,利用蛋白质上的磷酸基团与氧化铝的亲和力将鸽卵白蛋白修饰在表面包覆有氧化铝的氧化铁磁性奈米粒子(Fe3O4@Al2O3)表面,修饰过程利用微波加热30秒即可完成鸽卵白蛋白在Fe3O4@Al2O3奈米粒子之修饰,并以此探针为亲和辨识具有P菌毛之大肠杆菌。由穿透式电子显微镜影像观察发现,此磁性探针可成功辨识具有P菌毛之大肠杆菌;然而无法表达P菌毛的大肠杆菌,则无法被此磁性探针所辨识,因而在穿透式电子显微镜观察下只能看到奈米粒子。 本论文进一步将此探针用于萃取混合菌液样品中之目标细菌,并以基质辅助雷射脱附游离质谱法为分析方法,可根据细菌在质谱上所出现的离子峰分布,当作辨认不同菌种的参考,由实验结果发现此探针确会辨识具P菌毛之大肠杆菌,而且实验中也成功测试了其他三种不同亚种但均具P菌毛之大肠杆菌菌种(J96、BOS117、LOW31)。除此之外,此探针也被用于辨识含复杂基质的尿液样品中具P菌毛之大肠杆菌,而此功能化探针结合质谱分析的侦测极限约为9.6 × 104 cfu/mL;而除了大肠杆菌外,此奈米探针亦可透过Gal (α1-4)Galβ有效亲和表面含有PA-I凝集蛋白的绿脓杆菌。 在本论文中已成功设计了一种可辨识具P菌毛的大肠杆菌及绿脓杆菌,结合基质辅助雷射脱附游离质谱法应可实际应用于快速确认此类菌种。 |
URI: | http://140.113.39.130/cdrfb3/record/nctu/#GT009525550 http://hdl.handle.net/11536/38978 |
显示于类别: | Thesis |