人體α－胚胎蛋白的芪免疫分析法中幾種相關蛋白質純化方法

Abstract

本研究之最終目的在於發展生理液中α－胚胎蛋白的 免疫分析法，而本實驗對此相 關之三重蛋白質先予以純化，冀求在建立α－胚胎蛋白之分析系統中，能掌握材料自 給能力。 首先以白鳳豆做為Concanavalin A純化源，以Sephedex G 50 親和性管柱色層分析法 純化之並試添加鈣錳離子，探究其對產量及凝血活性的影響。而此蛋白質純化之目的 乃是利用其與醣化蛋白有特殊結合能力，用來做為α胚胎蛋白及洋山葵過氧化 純化 之親和性配位基。 本實驗並以Staphylococcus auteus Cowan I 菌株做為蛋白質A 之純化源，探討甲苯 對菌株自解作用的影響，進而以γ－球蛋白－Sepharose 4B，Sephadex G 150等管柱 純化蛋白質A ，而純化此蛋白質之目的，在於其能與適當 交聯，用來篩選融合瘤細 胞抗體及單胞抗體之用，或是用來純化抗體之親和性配合位基。 又本實驗以胎盤及臍帶血為γ－胚胎蛋白之純化源，除探討procion red HE 3B 對去 除蛋白之效應外，並以DEAE-Cellulose，blue dextran-Sepharose，Con A-Sepharos e 及IEF 等管柱予以部份純化，以為小白鼠免疫化中的抗原及進一步純化為 免疫分 析法之標準物。 本研究雖然於單株抗體技術及 免疫分析技術未能及時發展，但相關之三種蛋白質均 已成功的純化出來。本研究過程中，開發出新的蛋白質A 抽取方法值得進一步推廣及 應用。