以適應性有限元素法解金伯格藍道方程式

Abstract

魚類、小鼠、大鼠、狗及人類的嗅覺接受器基因，近年來在分子生物學方面已有許 多研究。嗅覺接受器基因具有multigene family及基因群集(gene cluster)的特性 ，是沒有intron的基因(intronless gene) 。而嗅覺接受器是屬於G protein-coup led 的接受器，具有7 個厭水性越膜區。為了對不同物種的嗅覺接受器基因有所了 解，及未來進行雞胚發生學的研究，因此本論文以雞為研究材料，選殖雞嗅覺接受 器基因。 首先以一段646 bp的聚合晦連鎖反應(olymerase chain reaction; PCR) 產物為探 針，篩選雞肝基因庫; 這段探針是以小雞成纖維母細胞(chick fibroblast cell)D NA為模板，經設計過的MSH3和MSH5為引子進行聚合晦連鎖反應，所得的產物與大鼠 嗅覺接受器基因核甘酸序列相同性達63% 。將篩選到的2 個噬菌體，經次選殖作用 後，得到4 個嗅覺接受器類似基因，其中3 個具有完整的開放編閱區，乃1 個基因 則末端於次選殖作用時被限制晦切斷。這三個具有完整開放編閱區的基因，可分別 推測轉錄出含322,322 ，及311 個胺基酸的蛋白質，並有73% 的胺基酸相同性，另 一不具有開放編閱區的基因可推測轉錄出295 個胺基酸序列。這4 個基因所轉錄出 的胺基酸序列可推測出7 個厭水性起膜區與一些已知的嗅覺接受器之共有的胺基酸 結構特性，譬如: 第1 越膜區的甘腰酸- 醯胺天門冬腰酸(Gly-Asn) 、第4 越膜區 中心位置的色胺酸(Trp) 、第5 越膜區近C 端的路腰酸(Tyr) 以及第7 越膜區的醯 胺天門冬胺酸- 脯胺酸(Asn-Pro) 。從這4 個基因在噬菌體DNA 中的限制晦圖譜得 知，5~8 kb的雞DNA genome中就具有2 個嗅覺接受器類似基因。再者，5'端上游區 (5'-flanking) 的核甘酸序列之分析，得知具有較高AT之比例，其中三個具有TATA box但無GC box之特性。 因此希望以此基因探究不同物種間嗅覺接受器之結構異同作特性分析，以及分析5' 端上游區與基因群集之特性，進而在未來雞胚發生學上提供基本材料。