二磷酸核苷去氧醣的胺基轉移酵素之分子選殖與功能性表現

Abstract

自古以來，天然有機化合物在藥物研發中扮演相當重要的角色，現今許多對抗疾病之重要天然物藥物中，如抗生素紅黴素、鏈黴素及臨床使用之抗腫瘤藥物多柔比星，因含有特殊胺基醣分子使其具有重要的生理或藥理活性，而修飾胺基醣分子結構，可為提供對抗產生抗藥性致病菌株的解決方式，以解決目前菌株產生嚴重抗藥性之難題。利用生物酵素催化合成各式新型天然物醣基分子，已成為藥物研發之研究主題之一。 本論文研究選擇天然物胺基去氧醣生物合成途徑中的胺基轉移酵素為研究主題，進行生合成酵素特性與活性表現之研究。分別由Saccharopolyspora erythraea與Streptomyces antibioticus中選殖出兩個二磷酸核苷去氧醣的胺基轉移酵素(3Atf1與3Atf2)，藉由大腸桿菌進行異體蛋白質表現，並以鎳離子親和性管柱層析法純化出此兩個酵素蛋白質，並進行活性測試與酵素特性探討，由實驗結果初步推測，此兩個酵素對四號酮基二磷酸核苷去氧醣受質可具反應催化之活性。研究中並進一步了解3Atf1酵素之活性特性與反應酸鹼值關係，以及酵素的光譜特性。