以生化質譜法分析青黴菌和麴菌孢子

Abstract

MALDI-MS及ESI-MS這兩種生化質譜法已被廣泛用於生化分子的分析。而在針對微生物的分析方面，不同的菌株經生化質譜法分析所得到的指紋質譜圖及生物標幟離子可以用以區分不同的菌種，因此如能建立微生物的指紋質譜圖及資料庫，可當作微生物菌種鑑定的參考。本論文以一般常污染穀物、水果或會產生赭麴毒素的七株青黴菌和四株麴菌孢子做為研究物種：包括Penicillium citrinum、 P. chrysogenum、P. digitatum、P. pinophilum、P. italicum、P. brevicompactum、P. expansum、Aspergillus niger、A. awamori、A. sulphureus及A. ochraceus等，利用MALDI-MS及ESI-MS建立可代表青黴菌及麴菌的生物標幟離子峰及指紋質譜圖。 由實驗結果可知，利用已配製在體積比為2:1混合而成之乙□與1% 三氟醋酸水溶液的2,5-二羥基苯甲酸或3,5-二甲氧基-4-羥基桂皮酸為基質，混以完整孢子細胞以進行MALDI-MS分析時，可得到再現性極佳的質譜圖。利用MALDI-MS於實際樣品的分析，再將結果比對已建立的孢子生物標幟離子可快速確認菌株種類，例如直接刮取腐敗水果上之真菌的孢子與基質混合後進行分析，所得之質譜圖中可觀察到重覆性極高的離子訊號出現在m/z 2600及m/z 5211，與本論文所得之標準菌株質譜圖相比對之下，可得知導致該水果腐敗之真菌為P. digitatum。 而利用ESI-MS進行分析時，由於無法得到高質量(>1000 Da)的生化分子之離子訊號，因此從實驗結果雖可看出不同屬種之青黴菌及麴菌的ESI質譜圖有些微差異，但仍不足以區分菌株的種類。