於逆流層析中以反微胞製備分離蛋白質

Abstract

我們於逆流層析儀中使用反微胞微乳液作為靜相，逆流層析管柱容積28 mL，使用含有100 mM sodium bis(2-ethylhexyl) sulfosuccinate (AOT)的n-hexane作為靜相，動相是酸鹼值以及離子強度梯度變化的緩衝溶液，動相流速1mL/min。在800 rpm轉速下，靜相滯留於管柱中的量為12 mL，分離1 mL含有肌紅蛋白、細胞色素C、溶菌酶各2 mg的蛋白質混合溶液，以不同的pH值以及鹽類濃度進行梯度冲提，得到逆流層析圖並每5mL收集一次，經過HPLC、MS分析各收集管中的蛋白質含量，可得到蛋白質相對濃度85 %的細胞色素C蛋白質溶液，有效回收率約為64 %，在製備蛋白質方面提供一新純化研究方向。