標題: 環境因子調控大腸桿菌RNase E 酵素活性與Rne基因表現之研究
Study Environmental Factors Regulation of RNase E Activity and Rne Gene Expression in Escherichia Coli
作者: 曾慶平
TSENG CHING-PING
國立交通大學生物科技學系(所)
關鍵字: 大腸桿菌;RNase E(rne基因);碳源;生長速率;飢餓反應;供氧量
公開日期: 2006
摘要: 轉錄後調控作用是影響基因表現的重要機制,在大腸桿菌內RNase E(rne)為降解mRNA之主要酵素,它會藉切割自身mRNA之5』-UTR區域來控制rne基因表現。本實驗室先前研究發現,含5』-UTR的rne-lacZ reporter fusion在不同碳源、厭氧狀態及生長速率改變時,rne-lacZ表現量有2~5倍變化,但不含5』-UTR之rne-lacZ表現則在葡萄糖培養時,表現反而2倍高於醋酸培養。此外以Northern blot 觀察菌體內 rne mRNA 表現量,發現在無氧情形下rne表現量為有氧狀態時的3倍,以葡萄糖為碳源時 rne表現為醋酸時的6倍。連續式培養發現,生長速率快之菌體內rne mRNA表現量較多。在飢餓狀態下,菌體中累積的rne mRNA也會快速降解。綜合以上研究結果顯示,不同碳源、生長速率、飢餓反應與供氧量均會影響rne基因表現有影響,其調控作用除了發生於轉錄過程,也可能在轉錄後作用。 為了釐清上述因子對rne基因表現之調控關係,未來兩年預計進行下列研究。第一年:將偵測上述不同環境因子對菌體內rne基因在轉錄、mRNA穩定性、轉譯、RNase E酵素活性的影響。第二年:進一步探討上述因子在各層次對rne基因的調控機制,包括ppGpp及轉錄子IHF、ArcA和Fnr對啟動子的作用、Hfq對rne mRNA穩定性測試、Lon protease對RNase E之降解作用等。由於degradosome內有RhlB、PPK、enolase等酵素,其活性與ATP含量有關,我們也將探討不同環境下能量狀態改變,是否會影響RNase E基因。經由建構不同環境因子對rne基因表現之影響與調控機制,可對微生物如何調控基因表現改變有更深一層認識。
官方說明文件#: NSC95-2311-B009-002
URI: http://hdl.handle.net/11536/89400
https://www.grb.gov.tw/search/planDetail?id=1296041&docId=238609
Appears in Collections:Research Plans