天然物K-252a生物合成基因的分子選殖研究與探討

Abstract

天然物是藥物中最豐沛的資源，現今有許多的藥物是來自於天然物或是其衍生物。許多天然物來自於不同的物種及具有不同功能的二次代謝物，可進而研發成各種不同的藥物，在製藥方面是非常值得研究的。 K-252a由Nocardiopsis sp.所產生，具有抑制protrein kinase C (PKC)之功能。近來更發現K-252a具抑制神經生長因子所誘導之神經細胞生成（NGF-induced neurite outgrowth）之功能。 K-252a不僅能抑制PKC，對於神經生長因子所誘導之神經細胞生成亦有抑制的功能，由此可知K-252a具有極高的研究價值。故在本論文中，經由一系列的分子選殖實驗及序列分析，找出與K-252a生物合成相關的基因。在大腸桿菌中建構了約5,800個Fosmid library clones，以聚合脢連鎖反應(PCR)方式掃瞄到可能包含K-252a生合成基因的Fosmid clone，目前已成功找到在Nocardiopsis sp.中參與K-252a生合成途徑的基因群。推測其中包含此天然物骨架的生合成基因。藉由找到的生物合成基因，可利用遺傳基因工程的方式產生新的天然物，並應用至疾病醫療上，以做為藥物研發用。